Organization
Faculty of Chemistry, Materials and Bioengineering Associate Professor
Title
Associate Professor
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YASUHARA,Hiroki
Degree
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博士(理学) ( 1994.3 )
Research Areas
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Life Science / Morphology and anatomical structure
Education
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Osaka University Faculty of Science Department of Biology
- 1988
Country： Japan
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Osaka University Graduate School, Division of Natural Science Physiology
1993
Country： Japan
-
Osaka University Graduate School, Division of Natural Science Physiology
1993
Professional Memberships
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The American Society of Plant Biologists
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The Botanical Society of Japan
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Japanese Society for Plant Cell and Molecular Biology
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The Japanese Society of Plant Physiologists
Papers
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TBK11, a Tobacco Kinesin-14-II, Associates with the Nuclear Envelope through Its Central Coiled-Coil Domain Reviewed
Hiroki Yasuhara, Kazuki Kitamoto
Cytologia 84(3): 285-291 2019.9
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A Kinesin-Related Protein, TBK11, Associates with the Nuclear Envelope throughout the Cell Cycle in Tobacco BY-2 Cells Reviewed
Hiroki Yasuhara, Wataru Kurisu
Cytologia 84(3): 277-283 2019.9
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Displacement of the mitotic apparatuses by centrifugation reveals cortical actin organization during cytokinesis in cultured tobacco BY-2 cells
Kengo Arima, Daisuke Tamaoki, Yoshinobu Mineyuki, Hiroki Yasuhara, Tomonori Nakai, Teruo Shimmen, Tohru Yoshihisa, Seiji Sonobe
JOURNAL OF PLANT RESEARCH 131 ( 5 ) 803 - 815 2018.9
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Time-sequential observation of spindle and phragmoplast orientation in BY-2 cells with altered cortical actin microfilament patterning
Kei H. Kojo, Hiroki Yasuhara, Seiichiro Hasezawa
Plant Signaling and Behavior 9 e29579 - e29579 2014.6
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Aphidicolin-Induced Nuclear Elongation in Tobacco BY-2 cells
Hiroki Yasuhara, Kazuki Kitamoto
PLANT AND CELL PHYSIOLOGY 55 ( 5 ) 913 - 927 2014.5
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Roles of Cortical Actin Microfilament Patterning in Division Plane Orientation in Plants
Kei H. Kojo, Takumi Higaki, Natsumaro Kutsuna, Yuya Yoshida, Hiroki Yasuhara, Seiichiro Hasezawa
PLANT AND CELL PHYSIOLOGY 54 ( 9 ) 1491 - 1503 2013.9
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Dual Observation of Microtubules and Actin Microfilaments during Cell Cycle Progression in BY-YTRF1 Cells Reviewed
Kei H. Kojo, Hiroki Yasuhara, Nastumaro Kutsuna, Seiichiro Hasezawa
CYTOLOGIA 78 (3) : 203-204 2013.9
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TMBP200, a XMAP215 homologue of tobacco BY-2 cells, has an essential role in plant mitosis
Hiroki Yasuhara, Yuki Oe
PROTOPLASMA 248 ( 3 ) 493 - 502 2011.7
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Caffeine inhibits callose deposition in the cell plate and the depolymerization of microtubules in the central region of the phragmoplast
H Yasuhara
PLANT AND CELL PHYSIOLOGY 46 ( 7 ) 1083 - 1092 2005.7
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Cell plate formation: knowledge from studies using tobacco BY-2 cells. Reviewed
YASUHARA Hiroki, Tetsuhiro Asada
In Nagata T et al. (ed.): ”Tobacco BY-2 cell”. Biotechnology in Agriculture and Forestry.Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, Tokyo pp116-131 2004
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The Phragmoplast; its Development and Function
YASUHARA Hiroki
pp.92-103 2000.10
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Inhibition of cell-plate formation by brefeldin A inhibited the depolymerization of microtubules in the central region of the phragmoplast
H Yasuhara, H Shibaoka
PLANT AND CELL PHYSIOLOGY 41 ( 3 ) 300 - 310 2000.3
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Effects of brefeldin A on the formation of cell plate in tobacco BY-2 cells,European Journal of Cell Biology 66
Hiroki Yasuhara, Seiji Sonobe, Hiroh Shibaoka
274頁-281頁 1995
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Effects of taxol on the development of the cell plate and of the phragmoplast in tobacco BY-2 cells,Plant and Cell Physiology 34(1) Reviewed
YASUHARA Hiroki, Sonobe Seiji, Shibaoka Hiroh
21頁-29頁 1993
Books
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Effects of brefeldin A on the formation of cell plate in tobacco BY-2 cells, European Journal of Cell Biology 66
YASUHARA Hiroki（ Role： Joint author）
1995
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Effects of taxol on the development of the cell plate and of the phragmoplast in tobacco BY-2 cells, Plant and Cell Physiology 34(1)
YASUHARA Hiroki（ Role： Joint author）
1993
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植物細胞における細胞質分裂の機構
安原 裕紀（ Role： Sole author）
『技苑』
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細胞質分裂における細胞骨格の働き
安原 裕紀（ Role： Joint author）
『遺伝』 47(11)
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フラグモプラスト研究の最近の話題
安原 裕紀（ Role： Joint author）
『植物細胞工学』 5 (6)
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Effects of Brefeldin A (BFA) on cell plate formation in tobacco BY-2 cells, XV International Botanical Congress, Yokohama, Japan
YASUHARA Hiroki
MISC
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Recent Advance in the Study of Cell-Plate Formation
Yasuhara Hiroki
Engineering & technology 20 65 - 70 2013.11
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植物細胞の細胞質分裂装置フラグモプラストの遠心的発達機構
安原 裕紀
日本植物学会第69回大会研究発表記録 p 88、1pSE6 2005
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安原 裕紀
『技苑』 102 pp.45-51 45 - 51 2000.1
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タバコ培養細胞BY-2の凍結保存
安原 裕紀
日本植物生理学会『植物組織細胞』 13(3) pp.331-335 1996
Presentations
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タバコ培養細胞 BY-2 のキネシン 14-II，TBK11の機能解析 TBK11 の機能解析
安原 裕紀, 栗栖 渉, 北本 一輝
日本植物形態学会 2019.9
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タバコBY-2細胞におけるYFP融合タンパク質の発現によるカロース合成酵素の可視化の試み
安原 裕紀, 堂段 祐貴, 中林 音奈, 木下 優
日本植物形態学会 2018.9
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Involvement of M phase-specific kinesin NACK1 in interacellular transport during the formation of cell plates
Michiko Sasabe, Takumi Higaki, Yuka Nishida, Shimon Morioka, Reina Suzuki, Tomohiro Uemura, Hiroki Yasuhara, Seiichiro Hasezawa, Takashi Ueda, Yasunori Machida
2018.3
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キネシン様タンパク質PAKRP2はフラグモプラスト赤道面の逆平行微小管領域の長さを調節する
安原 裕紀
日本植物学会 2016.9
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A role of phragmoplast associated kinesin NtPAKRP2 in tobacco BY-2 cells
YASUHARA,Hiroki, Inoue, Maimi, Yata, Masatoshi, Oonishi, Natsuka, Nakafunai, Maiko, Nakai, Eita, Yoshimoto, Satoshi
2016.3
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タバコBY-2細胞のフラグモプラスト形成におけるPAKRP2とMAP65-3の役割
安原 裕紀, 井上 真以美, 矢田 昌敏, 大西 夏佳, 上野 翠, 仲舟井 舞子, 中井 英太, 吉本 智
日本植物学会 2015.9
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タバコBY-2細胞のフラグモプラスト局在キネシンの解析
安原 裕紀, 井上 真以美, 矢田 昌敏, 大西 夏佳
日本植物学会第78回大会 2014.9
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細胞分裂における表層アクチン繊維および細胞分裂面形成の経時観察
湖城 恵, 桧垣 匠, 朽名 夏麿, 馳澤 盛一郎
日本植物生理学会 2014.3
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タバコBY-2細胞におけるアフィディコリン処理により誘導される核の伸長の機構
安原裕紀, 北本一輝
日本植物学会 2013.9
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Aphidicolin-induced nuclear elongation in tobacco BY-2
Hiroki Yasuhara, Kazuki Kitamoto
2013.3
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タバコBY-2細胞におけるアフィディコリン処理による核の過伸長
北本一輝, 安原 裕紀
日本植物学会 2012.9
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細胞周期における微小管ダイナミクスの変動はTMBP200のタンパク質量と関連するか？
松本英泰 (B), 渡辺香苗 (B), 田端清治 (B), 安原裕紀
第53回日本植物生理学会年会 2012.3
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タバコBY-2における核表面に局在するキネシン様タンパク質NMK1の機能解析
安原裕紀, 川本怜奈 (B), 榊本満里奈 (B), 宮本怜 (B), 北本一輝 (B), 光武翔 (B), 浅田哲弘(大阪大学)
日本植物学会第75回大会 2011.9
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タバコBY-2細胞における核表面に局在するキネシンNMK-1の機能解析
安原 裕紀, 川本 怜奈 (B), 榊本 満里奈 (B), 宮本 怜 (B), 北本 一輝 (B), 光武 翔 (B), 浅田 哲弘(大阪大学)
日本植物生理学会 2011.3
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タバコBY-2細胞のCHドメインを持つキネシン様タンパク質、TBK1、TBK2、TBK9の機能解析
安原 裕紀, 川本 怜奈 (B), 榊本 満里奈 (B), 宮本 怜 (B), 濱下 知子 (B), 光武 翔 (B), 浅田 哲弘(大阪大学)
日本植物学会 2010.9
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タバコ培養細胞BY-2のキネシン様タンパク質TBK1、TBK7、TBK11の細胞内局在
川本 怜奈 (B), 浅田 哲弘(大阪大学), 安原 裕紀
日本植物学会 2009.9
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タバコ培養細胞BY-2のXMAP215ホモローグTMBP200の機能ドメインの解析
安原 裕紀, 小西 麻由 (B), 松永幸大(大阪大学), 栗原大輔(大阪大学)
日本植物学会第72回大会研究発表記録 2008.9
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懸濁培養細胞と転写誘導系を用いた陸上植物特異的キネシン、TBK5の局在傾向の解析
浅田哲弘(大阪大学), 大津寄 佑香 (B), 安原 裕紀
日本植物学会 2008.9
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TMBP200の微小管結合ドメイン
安原 裕紀, 小西 麻由 (B), 磯部 靖夫 (B)
日本植物生理学会 2008.3
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タバコBY-2細胞におけるRNAiによるTMBP200の発現抑制がプロトプラスト由来細胞の伸長に及ぼす効果
安原 裕紀
日本植物生理学会 2007.3
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タバコBY-2細胞におけるGFP-TMBP200融合タンパク質の発現
安原 裕紀, 大江祐樹
第47回日本植物生理学会年会要旨集 2006
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タバコBY-2細胞におけるRNAiを用いたTMBP200の発現抑制
安原 裕紀, 大江祐樹
日本植物学会 2006
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シュート原基集塊を形成するシロイヌナズナのmsp変異体とサイトカイニン情報伝達
安原 裕紀, 宇都宮由恵
日本植物生理学会 2005.3
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フォトブリーチ法を用いたフラグモプラスト微小管の動態解析
安原 裕紀, 浅田哲弘, 祐村恵彦
第46回日本植物学会年会講演要旨集 2005.3
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タバコBY-2細胞におけるGFPとTMBP200部分断片の融合タンパク質の発現による細胞質分裂阻害
安原 裕紀, 作田宏平, 伊藤大貴, 三谷和夫, 鶴来隆幸
日本植物学会第68回大会研究発表記録 2004.9
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シュート原基の集塊を形成するシロイヌナズナの温度感受性変異体の単離
安原 裕紀, 上田佳代, 岩田英治, 松田光博
日本植物学会 2003.9
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YFP-tubulinを発現するBY-2細胞における細胞板のカロースの蓄積とフラグモプラスト微小管の分布変化
安原 裕紀, 廣井良伸, 作田宏平
日本植物生理学会 2003.3
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タバコ培養細胞BY-2の微小管束化タンパク質TMBP200のcDNAクローニングと細胞内局在
安原 裕紀, 村岡正明, 正垣宏樹, 森仁志
日本植物生理学会 2001.3
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タバコ培養細胞BY-2より単離したフラグモプラストへのCa2+の取り込み
安原 裕紀
日本植物学会第61回大会
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Effects of Brefeldin A (BFA) on cell plate formation in tobacco BY-2 cells,XV International Botanical Congress, Yokohama,Japan
YASUHARA Hiroki, Seiji Sonobe, Hiroh SHibaoka
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フラグモプラストの遠心的発達に対する細胞板形成の関与
安原 裕紀
日本植物学会第60会大会
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分裂終期のタバコ培養細胞BY-2より単離した微小管束化因子
安原 裕紀
日本植物学会第58会大会
Research Projects
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Mechanisms of the centrifugal development of the phragmoplast in higher plant cells
Grant number：18570051 2006 - 2008
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
YASUHARA Hiroki, ASADA Tetsuhiro
Grant amount：\3990000 （ Direct Cost: \3600000 、 Indirect Cost：\390000 ）
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植物細胞の細胞質分裂における微小管束化タンパク質TMBP200の機能解析
Grant number：15770033 2003 - 2005
日本学術振興会 科学研究費助成事業 若手研究(B)
安原 裕紀
Grant amount：\3600000 （ Direct Cost: \3600000 ）
TMBP200の全長とGFPの融合タンパク質を誘導発現するBY-2細胞を作出し、さらにこの形質転換株に35Sp::mRFP-βチューブリンcDNAを導入し、微小管も可視化された株を作出した。GFP-TMBP200は、間期の細胞では細胞質全体と、一部の細胞では表層微小管に局在し、分裂期の細胞では、紡錘体とフラグモプラストに局在した。また、GFP-TMBP200の誘導発現により、高頻度で、不均一な大きさの多数の核を持つ細胞が出現した。この多核細胞は、微小管破壊剤処理による有糸分裂阻害でみられるものとよく似ていた。GFP-TMBP200の発現による微小管の脱重合は観察されなかったが、異常な形態の紡錘体が観察されたことから、GFP-TMBP200の誘導発現により微小管の脱重合とは異なる機構で紡錘体の機能が阻害されたと考えられる。この結果は、TMBP200が、有糸分裂において重要な役割を果たすことを示唆するものである。このことを確かめるために、TMBP200に特異的な2本鎖RNAの転写誘導のためコンストラクトを構築し、これをBY-2細胞に導入して、TMBP200の発現抑制を試みたところ、2本鎖RNAの転写誘導時にのみTMBP200の発現が強く抑えられる株を取得することが出来た。これらの株では、TMBP200の発現抑制により高頻度で有糸分裂が阻害された。現在これらの株に35Sp::mRFP-βチューブリンcDNAを導入し、TMBP200の発現抑制により微小管構造がどの様に変化するかを検討している。
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IDENTIFICATION OF THE MICROTUBULE MOTOR FOR THE TRANSPORT OF CELL PLATE MATERIALS
Grant number：13640647 2001 - 2002
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
ASADA Tetsuhiro, YASUHARA Hiroki
Grant amount：\3500000 （ Direct Cost: \3500000 ）
Cells of higher plants are able to generate microtubule arrays that differ in architecture from those generaled in animal and fungal cells and that mediate higher plant-specific processes in cell division or morphogenesis. Although 1itt1e is known about the molecular basis of these abilities, comparative analyses of morphologies and ultrastructurcs of microtubule arrays predict that molecules involved in microtubule organization in higher plant cells might be, at leant in part, distinct from those in animal or fungal cells. In an attempt to understand the essential mechanisms for generating higher plant specific microtubule arrays, we characterize a higher plant-specific kinesin subtype, TBK5. Experiments in which TBK5 was overproduced in tobacco BY-2 cells showed that accumulated TBK5 can induce remarkable and characteristic changes in microtubule arrangements. Furthermore, immunofluorescence study using antibodies against recombinant TBK5 polypeptides showed that endogenous TBK5 proteins are not distributed along the length of microtubules. We currently explore the possibility shat the TBK5 kinesin subtype might be a component of microlubule-nucleating units playing a key role in the centrosome-independenl microtubule organization.
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分裂終期のタバコBY-2細胞より単離した190-KDaMAPの機能解析
Grant number：08740626 1996
日本学術振興会 科学研究費助成事業 奨励研究(A)
安原 裕紀
Grant amount：\1000000 （ Direct Cost: \1000000 ）
SDS-PAGE後PVDF膜にブロットして切り出した190-KDaMAPをBrCNにより部分分解し、得られたペプチド断片をSDS-PAGEで分離後、PVD膜にブロットした。幾つかのバンドを切り出し、ペプチドシークエンサーによってアミノ酸配列を調べた。これにより、それぞれ23、20、16、13残基の長さに4箇所のアミノ酸配列を解読する事ができた。検索の結果、得られた配列はいずれも、既知の配列との相同性が低かったため、190-kDaMAPが全く未知のタンパク質である可能性が考えられた。アミノ酸配列の情報を基に、対応するcDNAの配列を予想し、縮重が小さくなる部分を選んで、PCRのための縮重プライマーをセンスプライマーとアンチセンスプライマーを合わせて14通り合成した。PCRのための鋳型DNAとして、アフィディコリンを用いて細胞周期をG2期から前期に同調化したBY-2細胞よりSDS-LiCl法により単離した全RNAを、ポリTカラムで精製して得たmRNAからAMV逆転写酵素を用いて合成したものを用いた。作成したプライマーの意味のあるすべての組み合わせについて、TaKaRaLATaqを用いてPCRを行ったところ、多くの組み合わせにおいて、複数の産物の増幅が見られたが、幾つかの組み合わせにおいて特異的と思われる産物が増幅されたため、現在これらをTAクローンニングし塩基配列の解読を行っている。また、一箇所の部分アミノ酸配列から、二つ作成したプライマーを用いて、nested PCRによる増幅も試みている。
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分裂終期のタバコ培養細胞BY-2より単離した190-kDa MAPの研究
Grant number：06740608 1994
日本学術振興会 科学研究費助成事業 奨励研究(A)
安原 裕紀
Grant amount：\900000 （ Direct Cost: \900000 ）
細胞周期を分裂終期に同調化したタバコ培養細胞BY-2より得たミニプロトプラストから微小管を調製し、この微小管から、300mM KCl処理によって、190-kDa MAPを含む粗抽出分画を得、これをFPLC-Mono Sカラムにより精製した。この精製した190-kDa MAPをウシの脳由来のMAPを含まない微小管と、インキュベートした後、固定、包埋し、その切片を電子顕微鏡観察したところ、微小管と微小管を架橋するおよそ10nmの構造が認められ、この構造が190-kDa MAPであると考えられた。また、190-kDa MAPは、Mono-Sカラムによる精製段階で、収率が、甚だしく減少したため、この精製190-kDa MAPを抗原とした抗体の作成は諦め、190-kDa MAPの部分的なアミノ酸配列の決定に重点を置いた。
190-kDa MAPを 含む粗抽出分画をSDS-PAGEにかけたのち、PVDF膜にブロットしCBB染色を行い、目的のバンドを切り出して、アミノ酸シークエンサーにかけたところ、十分な量の蛋白を用いたにも関わらず、PTHアミノ酸の信号が得られず、190-kDa MAPのN末はブロックされているものと判断した。そこで190-kDa MAPを移したPVDF膜をブロテアーゼで処理し分解を試みた。6種類のブロテアーゼを検討したが、いずれも良好でなかったため、CNBrによる分解を行った。分解処理したものを再びSDS-PAGEにかけ、PVDF膜にブロットし、CBB染色をしたところ、分解処理の収率は低かったが、いくつかのバンドが認められた。これを、アミノ酸シークエンサーにかけたが、ペプチドの量が不十分であったため、PTHアミノ酸の信号が弱く、その配列を決定するには至っていない。現在、十分量のペプチドを用いてアミノ酸配列を決定する努力を継続している。
Devising educational methods
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学生実験において、顕微鏡画像共有システムを導入し、各受講者の観察している顕微鏡画像の教卓での確認や特定の学生の観察像の全員への配信などが出来るようにした。これにより、受講者の理解度が飛躍的に高まった。
Teaching materials
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特になし
Teaching method presentations
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特になし
Special notes on other educational activities
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特になし